摘要：研究天麻药酒的浸泡工艺及其对人血浆凝血系统的影响。以药酒中天麻素的含量为指标，采用正交试验考察药酒的浸泡条件；利用试剂盒检测药酒对人血浆凝血酶时间 （TT）、凝血酶原时间 （PT）、活化部分凝血活酶时间 （APTT）的影响。结果表明：天麻药酒的浸泡条件为：37 ℃，酒精体积分数 38%的白酒浸泡 35 d；天麻药酒具有显著的抗血凝作用。

天麻 （Gastrodia elata Blume） 为名贵中药材，性味甘平，有平肝息风的功能，常用于头痛眩晕、肢体麻木等症。近年来药理研究表明天麻对心血管系统、中枢神经系统、免疫系统等方面有较广泛的药理活性，其活性成分主要为天麻素。鉴于天麻较高的药、食用价值，目前已有开发相关保健饮料和口服液的报道。酒乃百药之长，而药酒是中药方剂中的一个重要组成部分。本实验模拟中国百姓家庭生活药酒浸泡的条件，以天麻素的含量为指标，采用正交设计等方法对天麻药酒进行了浸泡工艺的探讨；同时研究了天麻药酒对血液凝集系统的影响，为天麻药酒的大规模生产和进一步开发其药用价值提供实验依据。

1 材料与仪器

天麻 （购自安徽省大别山区药农，干燥、粉碎后过 180 目筛）；天麻素 （批号 807- 9201） 标准品购自北京生物制品检定所；北京红星二锅头，酒精的体积分数分别为 38%，52%，60%；肝素 （PSS，批号 0603145，常州千红生化制药有限公司，用时稀释到50 U/mL）；健康人血浆 （批号 200709162，合肥市红十字中心血站）；PT（批号 105030），TT（批号 121008），APTT（批号 1110071） 试剂盒为上海太阳生物技术有限公司生产；紫外- 可见分光光度计 （8453） 为美国 Agilent 产品。

2 方法

2.1 天麻药酒的浸泡工艺

2.1.1 分光光度法绘制天麻素标准曲线

配制 20μg/mL 的天麻素标准品乙醇溶液，置紫外—可见分光光度计中进行 200 nm～400 nm 波长扫描，找出天麻素的吸收波长。

精密称取天麻素标准品（80℃干燥 1h）59.25mg，用低水乙醇溶解，置 50 mL容量瓶中定容,作为贮备液。再精密量取 1 mL 贮备液至 50 mL 容量瓶中并用乙醇定容至刻度,天麻素标准品质量浓度为23.7μg/mL。绘制天麻素在吸收波长下的标准曲线。

2.1.2 天麻药酒浸泡工艺的正交试验

在试验过程中，有效成分浸泡效果往往受多种因素的交叉影响，为了全面考察浸泡效果，本研究设计了 L9（3）3三因素三水平正交试验，选择浸泡温度、时间、酒度数为考察因素。

根据正交试验软件得出的九组试验，每组设平行试验三个。每组用天麻粉 9 g，每瓶 3 g；每组用酒 150 mL，每瓶 50 mL，用保鲜膜封瓶口。将泡好的天麻药酒分别放入不同温度的保温箱中保温。

2.2 天麻药酒的抗血凝作用

2.2.1 天麻药酒的选择

选择 2.1.2 确定的浸泡条件浸泡的天麻药酒。将该天麻药酒原液分别稀释 2 倍、4 倍，将原液、稀释 2 倍和稀释 4 倍的溶液分别称之为天麻高剂量药酒、中剂量药酒和低剂量药酒。

2.2.2 天麻药酒对人血浆 PT、TT 和 APTT 的影响

天麻高剂量药酒、中剂量药酒和低剂量药酒对人血浆PT、TT 和 APTT(白陶土)的影响按试剂盒说明书并结合文献［6］进行，其中 APTT 试剂的用量改为0.2 mL （剂量加倍）。手工测定 PT、TT 和 APTT值，并通过统计学软件SPSS10.0 对其进行分析。

3 结果

3.1 天麻素标准曲线

对天麻素的标准品溶液在 200 nm～400 nm 范围内进行扫描，图 1 结果表明天麻素在紫外光区有2 个吸收峰 （222 nm 和 270 nm）；根据峰形和线性分析，在222nm处得到标准曲线：A=0.026C- 0.0097，r =0.9991，天麻素浓度为 2.37μg/mL～14.22μg/mL时适用该曲线。

3.2 天麻药酒浸泡工艺的正交试验

根据 3.1 所作标准曲线，对正交表中各天麻药酒浸泡组天麻素含量进行测定。

从样品中天麻素的含量及直观分析表的结果可以看出：浸泡温度、时间、酒度三个因素对天麻药酒中天麻素含量影响的顺序依次是：A>B>C。三个因素中浸泡时间对天麻素的含量影响较为显著,药酒浓度和浸泡温度对天麻素的含量变化影响较小。天麻药酒的浸泡条件是 A1B3C3，即温度 37 ℃，用酒精体积分数 38%的白酒浸泡 35 d。

3.3 天麻药酒对人血浆 PT，TT 和 APTT 的影响

经实验，低、中、高剂量天麻药酒能使 TT和 APTT 显著延长 （p<0.05 或 p<0.01）；中、高剂量天麻药酒能使 PT显著延长 （p<0.05）。

来源：惠合发酵罐厂家